膠原檢測試劑盒

背景簡介：

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）是一種高度動態(tài)且復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)，由膠原蛋白、糖胺聚糖（GAGs）、彈性蛋白、纖維連接蛋白及其他多種非細(xì)胞結(jié)構(gòu)的大分子網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成。ECM的核心功能是為細(xì)胞提供穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境，盡管不同組織和器官對細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的需求存在差異，但膠原蛋白始終是ECM的主要構(gòu)成成分。作為哺乳動物體內(nèi)豐富的蛋白質(zhì)家族，膠原蛋白約占蛋白質(zhì)總質(zhì)量的30%，它不僅是結(jié)締組織的主要組成部分，更在風(fēng)濕性疾病的炎癥進(jìn)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。癌癥、缺氧、遺傳性疾病、炎癥和衰老等因素均可調(diào)節(jié)膠原蛋白的合成。

為研究結(jié)締組織及其組分的生理性和病理性代謝，Chondrex公司推出系列檢測試劑盒：包括定量多種物種I型和II型膠原的ELISA試劑盒 、總膠原檢測試劑盒 、糖胺聚糖（GAGs）檢測試劑盒、DNA檢測試劑盒以及適用于組織和細(xì)胞培養(yǎng)樣本的代謝定量分析試劑盒。

產(chǎn)品描述：

1.I型膠原檢測試劑盒

I型膠原是豐富的膠原類型，存在于大多數(shù)結(jié)締組織中，如皮膚、骨骼、肌腱、韌帶、心臟和肺部 。被深入研究的I型膠原蛋白紊亂是纖維化，其標(biāo)志是膠原沉積的增加 Chondrex, I提供針對九種不同物種的I型膠原蛋白檢測ELISA試劑盒，包括用于檢測I型膠原C端端肽（C-Telopeptide）和N端端肽（N-Telopeptide）的試劑盒。

2. 小鼠/人C端肽（CTX-I）及N端肽（NTX-I）檢測ELISA試劑盒

小鼠/人類C端肽（CTX-I）及N端肽（NTX-I）檢測ELISA試劑盒：CTX-I（競爭性ELISA法）與NTX-I（夾心ELISA法）檢測試劑盒專用于定量降解的I型膠原蛋白肽片段。蛋白酶介導(dǎo)骨骼中I型膠原蛋白的吸收過程，并產(chǎn)生特定的膠原降解肽片段。例如，基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）特異性從I型膠原蛋白C端產(chǎn)生降解片段（ICTP），而組織蛋白酶K則從I型膠原蛋白的C端產(chǎn)生CTX-I片段、從N端產(chǎn)生NTX-I片段。這些膠原降解片段反映了I型膠原蛋白的代謝狀態(tài)，并可指示多種疾病狀態(tài)下的蛋白酶活性。因此，通過免疫檢測方法監(jiān)測生物體液中這些降解片段的水平已成為重要手段。Chondrex公司利用可識別物種間保守肽序列的單克隆抗體，開發(fā)了適用于小鼠和人類樣本的CTX-I與NTX-I檢測ELISA試劑盒。

3. II型膠原檢測試劑盒

II型膠原蛋白其組織分布僅限于無血管組織（如軟骨和眼睛玻璃體）。由于II型膠原蛋白能在實(shí)驗(yàn)動物中誘發(fā)關(guān)節(jié)炎，在人某些自身免疫性疾?。ㄈ珙愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）、與RA相關(guān)的眼部疾病以及影響含II型膠原特定組織的復(fù)發(fā)性多軟骨炎）的發(fā)病機(jī)制中，II型膠原蛋白的自身免疫反應(yīng)起到作用。II型膠原蛋白檢測ELISA試劑盒旨在定量檢測多種物種（包括人、猴、豬、牛、大鼠、小鼠、兔、馬和雞）的細(xì)胞/組織培養(yǎng)物和組織樣本中的天然II型膠原蛋白含量。

該試劑盒對天然形式（未變性）膠原蛋白具有高度特異性，同時對變性膠原蛋白的反應(yīng)性較低。因此，在制備用于該檢測的組織樣本時，必須采用特殊的膠原蛋白溶解方案以防止膠原蛋白變性。

4.羥脯氨酸檢測試劑盒（檢測總膠原蛋白）

羥脯氨酸檢測試劑盒用于定量檢測組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物和組織培養(yǎng)物中的總膠原蛋白含量（任何類型和物種）。羥脯氨酸作為膠原蛋白的主要組成成分，約占其氨基酸總量的13.5%。由于羥脯氨酸在膠原蛋白和彈性蛋白中的分布高度特異性，其含量通?？煞从硺悠分械哪z原蛋白總量。因此，通過定量羥脯氨酸來評估組織纖維化或膠原沉積程度已成為常用方法。傳統(tǒng)羥脯氨酸檢測方法需要繁瑣的操作流程和特殊工具。相比之下，Chondrex公司推出的羥脯氨酸檢測試劑采用經(jīng)過優(yōu)化的檢測系統(tǒng)，可在96孔板上輕松精準(zhǔn)地完成操作。該檢測方法適用于天然膠原和變性膠原的總含量測定。樣品無需進(jìn)行膠原溶解處理，但檢測前必須進(jìn)行水解步驟。通過水解處理，可從總膠原樣品中解離出游離羥脯氨酸。

5. 天狼猩紅總膠原檢測試劑盒（檢測可溶性總膠原蛋白）

天狼猩紅總膠原檢測試劑盒采用天狼猩紅染料作為檢測試劑，用于測定樣品中可溶性膠原蛋白濃度。該染料能特異性結(jié)合纖維狀膠原（I-V型）的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)。本試劑盒無法區(qū)分膠原蛋白種類與類型，適用于檢測樣品中的總膠原含量。由于細(xì)胞培養(yǎng)基中膠原含量較低，若檢測對象為細(xì)胞培養(yǎng)基樣本，可能需進(jìn)行額外濃縮步驟。

本試劑盒僅可檢測樣品中的可溶性天然（未變性）膠原蛋白。若研究需區(qū)分天然與變性膠原蛋白，可采用羥脯氨酸檢測法測定總膠原含量—天然膠原（天狼猩紅法）與總膠原（羥脯氨酸法）的差值即為變性膠原水平。標(biāo)準(zhǔn)版試劑盒需搭配分光光度計使用，而96孔板式天狼猩紅膠原檢測試劑盒專為酶標(biāo)板設(shè)計，可同步檢測多種含膠原樣本（組織標(biāo)本、細(xì)胞培養(yǎng)基、培養(yǎng)細(xì)胞），操作時間僅需30-60分鐘（視樣本數(shù)量而定），檢測波長為540 nm。

6. 天狼猩紅總膠原染色試劑盒

天狼猩紅與固綠是一種聯(lián)合染色方案，可用于區(qū)分膠原蛋白與周圍組織成分。天狼星紅特異性結(jié)合纖維狀膠原的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)，而固綠則與非膠原蛋白結(jié)合。由于這兩種染料分別在540 nm和605 nm波長處具有特征吸收峰，通過測定提取染料的吸光度值即可計算出樣品中膠原蛋白與非膠原蛋白的含量。Chondrex公司利用這兩種染料的性質(zhì)，開發(fā)出可同步檢測培養(yǎng)細(xì)胞層和組織切片中膠原蛋白與非膠原蛋白含量的半定量檢測試劑盒。該檢測法無需膠原蛋白溶解步驟，可直接測量各種組織中的總膠原含量。檢測結(jié)果可通過固綠染色OD值對非膠原蛋白進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化校正。對于厚度10-20μm的常規(guī)組織切片，該檢測對膠原蛋白和非膠原蛋白的靈敏度分別可達(dá)3μg/切片和50μg/切片。試劑盒所含試劑可滿足30-50個樣本的染色需求。

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